rna跑胶用多少μ？ - 散珠屏幕网

一、rna跑胶用多少μ？

跑胶的时候，用4ul RNA溶液+2 ul loading buffer。

保证RNA的浓度在150-300ng/ul，这时所得到的条带会比较清晰。

总 RNA 的电泳检测，原来我使用 Lambda DNA/EcoR I （或者 Hind III）酶切 Marker，现在基本上不再用 Marker 了。指示剂一定是溴酚蓝加二甲苯氰，胶浓度 1-1.2%。加样后，开始电泳 (电压的选择的唯一依据是，我后面的时间安排。)。

二、rna跑胶方法？

RNA电泳可以在变性及非变性两种条件下进行。非变性电泳使用1.0%--1.4%的凝胶，不同的RNA条带也能分开，但无法判断其分子量。只有在完全变性的条件下，RNA的泳动率才与分子量的对数呈线性关系。因此要测定RNA分子量时，一定要用变性凝胶。在需快速检测所提总RNA样品完整性时，配制普通的1%琼脂糖凝胶即可。

三、rna跑胶步骤？

四、rna跑胶检测方法？

五、rna跑胶用什么缓冲液？

我们这边RNA电泳用的是的Mops缓冲剂，也就是3-（N吗啡啉）丙磺酸，属于生物缓冲剂，经常用于配置RNA电泳缓冲液。我们这边一直用新德晟的，一直很稳定。当然不同的试验用哪一种你需要去咨询一下

六、rna跑胶要注意什么？

RNA电泳可以在变性及非变性两种条件下进行。非变性电泳使用1.0%--1.4%的凝胶，不同的RNA条带也能分开，但无法判断其分子量。只有在完全变性的条件下，RNA的泳动率才与分子量的对数呈线性关系。

注意一定要用变性凝胶。在需快速检测所提总RNA样品完整性时，配制普通的1%琼脂糖凝胶即可。

七、rna跑胶标准条带大小？

提取的总RNA跑胶从大到小有带3条。三条是主带。哺乳动物的RNA包括mRNA,rRNA,tRNA和du小RNA,根据分子量和沉降系数的不同,rRNA又可分为28s, 18s 和5.8s 的rRNA。

从RNA的含量上看,rRNA是几种RNA中最多的,高达90%以上,而mRNA很少。只有1-2%，而其他两种RNA的分子量比较小，这就解释了为什么从凝胶电泳的结果上只能看到三条带。

而这三条带的完整性，就代表了mRNA的完整性。

八、RNA跑胶后再EB染色行吗？

是变性电泳还是非变性电泳？非变性电泳一般是把溴乙锭加到凝胶内，如果是变性胶可以按照下面的方法进行染色。

1.电泳结束后，将凝胶在DEPC处理水中浸泡15分钟，除去凝胶中的甲醛。

2.使用DEPC处理水制备的EtBr（5 mg/ml）染色2~3分钟。用DEPC处理水脱色30分钟，再换水脱色30分钟后成像观察。如果背景偏高时可以进一步进行过夜凝胶脱色。注意：甲醛凝胶用EtBr染色比较麻烦，即使RNA样品染上了明显的条带也会带来较高的背景。因此，应控制凝胶在染色剂中的浸泡时间小于5分钟，以降低背景。